Modelos in vitro de infección por Trypanosoma cruzi para estudios de tropismo e infección placentaria.

Abstract

El objetivo general de este trabajo fue desarrollar y aplicar modelos in vitro para la infección por T. cruzi, enfocados en la transmisión congénita, que permitan estudiar mecanismos de invasión y tropismo placentario. La infección se evaluó en cultivos en monocapa de la línea celular trofoblástica humana BeWo, utilizando como controles las líneas no placentarias HeLa y Vero, y dos cepas de parásitos. La cepa K98, perteneciente al UDT I, fue aislada de un paciente con Chagas crónico, mientras que VD, del UDT VI, se aisló de un caso de Chagas congénito. La cuantifi cación de la carga parasitaria se llevó a cabo por PCR cuantitativa en tiempo real, dirigida a los genes EF1-α de T. cruzi y GAPDH para BeWo y HeLa.

The general objective of this work was to develop and apply in vitro models for T. cruzi infection, focusing on congenital transmission, to study mechanisms of transplacental invasion and tropism. T. cruzi infection was evaluated in monolayer cultures of the human trophoblastic cell line BeWo, using non-placental cell lines HeLa and Vero as controls, and two parasite strains. The K98 strain, belonging to DTU I, was isolated from a patient with chronic Chagas disease, while VD, from DTU VI, was isolated from a congenital Chagas case. Parasite load quantifi cation was performed using real-time quantitative PCR targeting T. cruzi EF1-α genes and GAPDH for BeWo and HeLa.